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核酸檢測操作流程有哪些 核酸檢測的原理是什么

摘要:很多人以為核酸檢測就是采集一下就完成了,其實核酸檢測遠比這復雜的多,核酸檢測操作流程有采集分泌物、進行留樣、樣本送檢、核酸提取、熒光PCR核酸檢測、核酸檢測報告,很多操作步驟都要手工進行,因此需要花費一定的時間。核酸檢測的原理是利用熒光定量PCR(聚合酶鏈式反應)。接下來本文將簡單介紹核酸檢測操作流程有哪些以及核酸檢測的原理是什么,一起來看看吧!

一、核酸檢測操作流程有哪些

目前,全國大部分城市都提供了核酸檢測,那么,核酸檢測要經(jīng)過哪些步驟呢?下面一起了解下核酸檢測操作流程有哪些:

1、采集分泌物

首先,醫(yī)務人員會使用咽拭子擦拭受檢者鼻腔或者喉嚨扁桃體處,采集唾液分泌物,這個過程其實蠻疼的。

2、進行留樣

將人體分泌物采集出來以后,咽拭子浸到保存液中,將管子蓋子旋好進行留樣。

3、樣本送檢

然后,將樣本裝入到干凈的密封袋中封好,送到相關(guān)部分進行檢測。

4、核酸提取

相關(guān)部門將送來的樣本,送到指定實驗室做核酸提取實驗。

5、熒光PCR核酸檢測

核酸提取出來以后,再使用熒光PCR進行檢測使用,檢測是否有擴增反應,也就是判斷陰性還是陽性。

6、出核酸檢測報告

最后,根據(jù)核酸檢測的熒光PCR反應結(jié)果,得出核酸檢測報告,本人查詢結(jié)果即可。

二、核酸檢測的原理是什么

檢測新型冠狀病毒特異序列的方法最常見的是熒光定量PCR(聚合酶鏈式反應)。因PCR反應模板僅為DNA,因此在進行PCR反應前,應將新型冠狀病毒核酸(RNA)逆轉(zhuǎn)錄為DNA。在PCR反應體系中,包含一對特異性引物以及一個Taqman探針,該探針為一段特異性寡核苷酸序列,兩端分別標記了報告熒光基團和淬滅熒光基團。探針完整時,報告基團發(fā)射的熒光信號被淬滅基團吸收;如反應體系存在靶序列,PCR反應時探針與模板結(jié)合,DNA聚合酶沿模板利用酶的外切酶活性將探針酶切降解,報告基團與淬滅基團分離,發(fā)出熒光。

每擴增一條DNA鏈,就有一個熒光分子產(chǎn)生。熒光定量PCR儀能夠監(jiān)測出熒光到達預先設定閾值的循環(huán)數(shù)(Ct值)與病毒核酸濃度有關(guān),病毒核酸濃度越高,Ct值越小。不同生產(chǎn)企業(yè)的產(chǎn)品會依據(jù)自身產(chǎn)品的性能確定本產(chǎn)品的陽性判斷值。

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