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液相色譜儀操作流程是什么 液相色譜儀操作注意事項(xiàng)有哪些

摘要:液相色譜儀引入了氣相色譜儀的理論,技術(shù)上采用了高壓輸液泵、高效固定相、梯度洗脫技術(shù)和高靈敏度檢測器,具有高壓、高速、高效、高靈敏度、高選擇性和應(yīng)用范圍廣等特點(diǎn)。接下來本文將簡單介紹液相色譜儀操作流程是什么以及液相色譜儀操作注意事項(xiàng)有哪些,一起到文中來看看吧!

一、液相色譜儀操作流程是什么 ?

生活中液相色譜儀并不常見,液相色譜儀是利用混合物在液-固或不互溶的兩種液體之間分配比的差異,對(duì)混合物進(jìn)行先分離,而后分析鑒定的儀器。那么液相色譜儀操作流程是什么呢?一起來看看吧!

首先先對(duì)流動(dòng)相進(jìn)行過濾,根據(jù)需要選擇不同的濾膜,一般為有機(jī)系和水系,常用的孔徑為0.20um和0.45um。然后對(duì)抽濾后的流動(dòng)相進(jìn)行超聲脫氣10-20分鐘。一般情況下,流動(dòng)相沖洗20-30分鐘后,儀器方可穩(wěn)定,最重要的是儀器基線走后,方可進(jìn)樣測試。

二、液相色譜儀操作注意事項(xiàng)有哪些

1、流動(dòng)相必須用HPLC級(jí)的試劑,使用前過濾除去其中的顆粒性雜質(zhì)和其他物質(zhì)。

2、流動(dòng)相過濾后要用超聲波脫氣,脫氣后應(yīng)該恢復(fù)到室溫后使用。

3、不能用純乙腈作為流動(dòng)相,這樣會(huì)使單向閥粘住而導(dǎo)致泵不進(jìn)液。

4、使用緩沖溶液時(shí),做完樣品后應(yīng)立即用去離子水沖洗管路及柱子一小時(shí),然后用甲醇沖洗40分鐘以上,以充分洗去離子。對(duì)于柱塞桿外部,做完樣品后也必須用去離子水沖洗。

5、長時(shí)間不用儀器,應(yīng)該將柱子取下用堵頭封好保存,注意不能用純水保存柱子,而應(yīng)該用有機(jī)相,因?yàn)榧兯组L霉。

6、每次做完樣品后應(yīng)該用溶解樣品的溶劑清洗進(jìn)樣器。

7、C18柱絕對(duì)不能進(jìn)蛋白樣品,血樣、生物樣品。

8、堵塞導(dǎo)致壓力太大,按預(yù)柱→混合器中的過濾器→管路過濾器→單向閥檢查并清洗。

9、氣泡會(huì)致使壓力不穩(wěn),重現(xiàn)性差,所以在使用過程中要盡量避免產(chǎn)生氣泡。

10、如果進(jìn)液管內(nèi)不進(jìn)液體時(shí),要使用注射器吸液:通常在輸液前要進(jìn)行流動(dòng)相的清洗。

11、要注意柱子的pH值范圍,不得注射強(qiáng)酸強(qiáng)堿的樣品,特別是堿性樣品。

12、更換流動(dòng)相時(shí)應(yīng)該先將吸濾頭部分放入燒杯中邊振動(dòng)邊靖洗,然后插入新的流動(dòng)相中。更換無互溶性的流動(dòng)相時(shí)要用異丙醇過渡一下。

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