一、apoe基因檢測是什么意思

APOE基因檢測，又稱載脂蛋白E基因檢測，APOE是apolipoprotein E的縮寫，翻譯過來就是載脂蛋白E，它是一種多態(tài)性蛋白，參與脂蛋白的轉(zhuǎn)化與代謝過程，其基因可以調(diào)節(jié)許多生物學(xué)功能，與許多眼科疾病發(fā)病有關(guān)，對ApoE及其基因多態(tài)性的研究是醫(yī)學(xué)研究的熱點之一，探討兩者之間的內(nèi)在聯(lián)系，對眼病的預(yù)防、診斷及治療具有重要的臨床應(yīng)用價值。

二、APOE基因檢測的意義

在臨床上通過APOE基因檢測主要是針對于載脂蛋白e基因的檢測，一般可將患者分為E2、E3、E4三個表現(xiàn)型，每個表現(xiàn)型在不同的疾病的發(fā)生率上都有不同的特點。

我國大多數(shù)人群屬于E3表現(xiàn)型，屬于相對較為均衡的類型。E4表現(xiàn)型患者出現(xiàn)動脈粥樣硬化、冠狀動脈粥樣硬化性心臟病和癡呆的風(fēng)險相對比較低，黃斑變性導(dǎo)致視力損害的可能性相對較高。E2表現(xiàn)型患者幾乎不太可能出現(xiàn)黃斑變性，但是出現(xiàn)癡呆和冠心病的風(fēng)險相對反而過高。

三、APOE基因檢測的方法

APOE基因檢測既可以以VLDL為樣品，又可以直接以血清（或血漿）為樣品，通過IEF電泳分析、雙向PAGE或結(jié)合免疫印跡法進(jìn)行測定：

1、等電聚焦法（IEF）

由于三種主要ApoE異構(gòu)體E2、E3和E4的等電點（pⅠ）分別為5.89、6.02和6.68，E4比E3多一個正電荷，而E2比E3少一個正電荷。因此，可應(yīng)用1EF檢測這些異構(gòu)體間電荷差異而確定不同ApoE表型。傳統(tǒng)ApoE表型檢測方法多采用超速離心法或化學(xué)沉淀法分離VLDL，脫脂后進(jìn)行IEF，然后進(jìn)行染色分析。這種方法需要血清量較多，昂貴、費(fèi)時，又需要大型設(shè)備，不適合大規(guī)模研究。ApoE異構(gòu)體之間染色程度之間差異及電泳過程中泳動距離的變異性也造成結(jié)果的不穩(wěn)定性。

2、雙相電泳法（two-dimensional electrophoresis）

第一相應(yīng)用IEF電泳將等電點不同的蛋白質(zhì)分離；第二相根據(jù)蛋白質(zhì)分子量不同及濃度的差異，應(yīng)用SDS-PAGE進(jìn)行分離，由此確定ApoE表型。此技術(shù)能解決IEF遇到的一些轉(zhuǎn)錄后修飾的問題，臨床標(biāo)本用量也很少，并且可以同時進(jìn)行定性和定量分析，但由于成本昂貴而且費(fèi)時，有時也難以清晰地分辨表型，故臨床上應(yīng)用較少。

3、免疫印跡法（immunoblotting）

血清脫脂后，經(jīng)IEF電泳將ApoE與其他蛋白質(zhì)分離，然后將凝膠中蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)移到硝酸纖維素（NC）膜上，用抗ApoE抗體作為一抗進(jìn)行免疫印跡反應(yīng)或采用直接的免疫固定法，即可靈敏而特異地顯示出ApoE區(qū)帶的位置，從而確定ApoE表型。此方法利用抗原-抗體的特異反應(yīng)，排除了血清其他蛋白質(zhì)的干擾，不需超速離心分離VLDL，血清用量少，是國內(nèi)外實驗室檢測ApoE表型常用的方法之一。但此類方法亦存在一些缺點，如對于存在與普遍異構(gòu)體具有相同電荷的罕見異構(gòu)體標(biāo)本，或在糖尿病等病理狀態(tài)時，由于轉(zhuǎn)錄后修飾引起蛋白質(zhì)變化的標(biāo)本檢測時，就會給出錯誤的結(jié)果。